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AKTA_purifierFrac920層析儀使用操作規程介紹

1、 開機 
打開儀器的主電源,打開電腦電源。待儀器自檢完畢(CU950上面的3個指示燈完全點亮并不閃爍)。雙擊桌面上UNICORN圖標,進入操作界面。 2、 準備工作溶液和樣品 
所有的工作溶液和樣品必須經過0.45µm的濾膜過濾,樣品也可高速離心后取上清備用。當緩沖液中含有有機溶劑(如乙腈、甲醇),需在使用前用低頻超聲脫氣10min。 3、 清洗及管道準備 
shou先將A1管道放入緩沖液或平衡液,binding buffer中,將B1管道放入高鹽溶液中或elution buffer,在system control窗口點擊工具欄內的manual,選擇 pump→pump wash purifier,選中A1,B1管道為ON, execute。泵清洗將自動結束。 4、 安裝層析柱 
在manual里選擇pump→flow rate,輸入流速1ml/ml,insert;選擇Alarm&mon→alarm pressure,設置high alarm(輸入填料的耐受壓力,可在填料說明書中查到),insert,execute。待
InjectionValve的1號位管道流出水后接入柱子的柱頭,稍微擰緊后將柱下端的堵頭卸掉接入管道連上紫外流動池。 
5、 開始純化: 
1)選擇檢測波長,Alarm&mon→Wavelength→UV1,UV2,UV3(可以直打開一個波長)等待柱子平衡好了(觀察電導COND,pH的數值和變化趨勢)就準備上樣了。此時將紫外調零,選擇Alarm&mon→autozero,exectue。 
2)用樣品環上:將樣品吸進注射器,推掉氣泡,從injectionValve的3號位推入,推好后不要取下注射器。在manual里選擇flowpath→injectionValve→inject,execute。 
3)用泵上樣:有A2入口)manual里選擇flowpath→Ainlet→A2, insert, flowpath→injectmark, insert, execute待樣品上完后,再將manual里選擇flowpath→Ainlet→A1,平衡液中繼續清洗柱子 
2),3)選擇一種方式 2),3)選擇一種方式 
4)洗脫:上樣后用緩沖液盡量將穿透峰洗回基線。在manual里選擇pump→gradient,按照自己的工藝選擇targetB(100%)和length(10CV)。 
5)設定收集: 
固定體積收集:選擇Frac→Man_fractionation,選擇收集Rack型號、收集順序以及tube類型,輸入每管收集體積,exectue。結束固定體積收集選擇Frac→fractionation_stop,exectue。 
峰收集:選擇Frac→Peak_fracParametersUV_Level,設定峰收集的參數,選擇Frac→Peak_Man_fractionation設定峰收集每管收集的體積,exectue。結束峰收集選擇Frac→Peak_frac_stop,exectue。 6、 清洗泵及卸下層析柱: 
將A1和B1入口放入純水中,啟動pump wash purifier功能沖洗A泵和B泵及整個管路。然后再將A1和B1入口放入20%乙醇中,同樣操作將乙醇沖滿整個管路保存。系統給柱子一個慢流速,設置系統保護壓力,然后先拆柱子的下端,正在滴水的時候將堵頭擰上,再拆柱子的上端,**后擰上上端的堵頭。整個過程防止氣泡進入。 7、 關閉電源: 
    從軟件控制系統的**個窗口unicorn manager點擊退出,其他窗口不能單獨關閉。然后關閉AKTA主機電源,關閉電腦電源。
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