作者在制作聚丙酞胺梯度凝膠 電泳時 ,
曾使用有關(guān)廠家生產(chǎn)的有機(jī)玻璃材質(zhì)的
梯度混合儀 , 多次使用后 發(fā)現(xiàn)許多不便之處 , 便自
行設(shè)計制作了簡易的梯度形成儀。 制作簡單 ,
并收到了良好的使用效果。 現(xiàn) 以灌制總混合體積
6一 12 m l 的聚丙烯酞胺凝膠溶液為例 , 介紹如下 。
1 梯度儀的制作 見圖
1 。 取 52 lm 平底
刻度玻璃試管
2 支 , 分別自底部向上約 07
m m 處截斷。 然后取一個作稀溶液管 , 在其底
部熔開一孔 , 接上一個長約 51 m m , 內(nèi)徑1· 5
m
m 的玻璃管
( 玻璃加工
) , 使玻璃管內(nèi)徑底
緣線與試管底面平齊
; 取另一試管作濃 溶液
管 , 在其底部對稱兩側(cè)按上述方法分別接上
一 個長約 51 m m , 內(nèi)徑 1 . 5 m m 的玻璃管 ( 玻
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璃加工 ) 。 將兩個制作好的管子固定在鐵架臺
上 , 按圖示方法 以相應(yīng)尺寸的硅膠管進(jìn)行連
接
。
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圖 1 梯度混合裝置示意圖
1 一 硅
膠管 ; 2 ~ 蠕
動泵 ; 3 ~ 垂
直電泳夾 心板 ; 4 一 濃
溶液
管; 5 二 稀
溶液
管 ; 6 一 血
管夾
夾緊處 ; 7 一磁力攪拌器
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卷 |
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期 |
河 |
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醫(yī) |
學(xué)學(xué)報 |
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南 |
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科大 |
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2 使用方法 使用前用血管夾夾住管 間
通道 , 向稀溶液管內(nèi)加入稀溶液 , 稍許松開血管夾 , 使稀溶液充滿整 個管間通道并有極少量流入濃溶液管 , 然后向濃溶液管加入濃溶液 , 待試劑加全 以后 , 開 啟
蠕動泵 并移開血管
夾 , 控制一定的流速 , 即可形成均勻的梯度凝
膠溶液。
3 體會 ① 采用血管夾 控制管間通道非
常方便 , 而市售梯度儀常采用的旋塞 閥
, 在某些情況下如加濃溶液之前將稀溶液充滿管間通道 , 操作起來就比較困難。 ② 一般梯度儀管間通道的清洗很困難 , 而這種設(shè)計正 好解決
了這一難題 。 ③玻璃材質(zhì)方便了洗滌 , 潔凈的
玻璃表面不會存在 貼壁液滴 , 梯度儀用完后
用純水潤洗數(shù)次即可進(jìn)入下一輪使用可減少
洗滌 次數(shù)。 ④ 廠家的產(chǎn)品規(guī)格畢竟有限
, 對于特定的混合體積 , 梯度儀容量太大或太小, 都
將影 響梯度產(chǎn)生的效果。 作者原使用管內(nèi)徑
約為 3 0 m m 的梯度儀 , 對于 6 一 1 2 m l 的混
合體積 , 很難形成均一的梯度 , 改用自制梯度儀后
, 電泳結(jié)果和操作穩(wěn)定性都有明顯提高。再者
, 梯度儀并非實驗室常備器械
, 需用 時可就地取材制作。
(1 9 94 一 1 2一 。 6 收稿
責(zé)任編輯侯衡廣 )
